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      • 細胞生物學實驗報告

        時間:2023-12-19 11:25:38 詩琳 生物/化工/環(huán)保/能源 我要投稿
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        細胞生物學實驗報告(精選5篇)

          在學習、工作生活中,報告有著舉足輕重的地位,報告包含標題、正文、結(jié)尾等。其實寫報告并沒有想象中那么難,下面是小編幫大家整理的細胞生物學實驗報告,希望對大家有所幫助。

        細胞生物學實驗報告(精選5篇)

          細胞生物學實驗報告 1

          實驗目的

         、睂W習并掌握動物細胞培養(yǎng)的無菌操作技術。

         、擦私庠毎囵B(yǎng)的基本方法及操作過程。

         、硨W習細胞計數(shù)及營養(yǎng)液的配制。

          實驗原理

         、奔毎囵B(yǎng)

          原代細胞培養(yǎng)是指直接從動物體內(nèi)獲取的細胞、組織和器官,經(jīng)體外培養(yǎng)后,直到第一次傳代為止。這種培養(yǎng),首先用無菌操作的方法,從動物體內(nèi)取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分解成單個游離細胞,在人工培養(yǎng)下,使其不斷的生長及繁殖。

          細胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹?shù)膶嶒灱夹g。要使細胞能在體外長期生長,必須滿足兩個基本要求:一是供給細胞存活所必須的條件,如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴格控制無菌條件。

         、布毎阑铊b定死活細胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法,簡便,易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理,但無論采用何種辦法,都是利用了死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異。

          染色法分化學染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。

          死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異主要包括:

          ☆死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的.通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺盼藍,又稱錐藍,是一種陰離子型染料,不能通過完整的細胞膜。所以經(jīng)臺盼藍染色后只能使死細胞著色,而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。植物細胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。

          ☆死活細胞在代謝上的差異:是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據(jù)。美藍是一種無毒染料,氧化型為藍色,還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用,使細胞內(nèi)具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化性變?yōu)闊o色的還原型,因此美藍染色后活的酵母細胞無色;而死細胞或代謝緩慢的老細胞,則因它們的無還原能力或還原能力極弱,使美藍處于氧化態(tài),從而被染成藍色或淡藍色。

          除此之外,還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細胞液泡著紅色,而細胞質(zhì)和細胞核不被著色;死細胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散于整個細胞中,細胞核和細胞質(zhì)被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用,如甲基藍-中性紅混合染色法。

          實驗用品

         、辈牧闲“资

          ⒉試劑

          臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養(yǎng)液(含生長因子)

         、称鞑

          剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學顯微鏡、倒置光學顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養(yǎng)皿、酒精燈、塑料培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數(shù)板

          實驗步驟

         、比〔

          取小鼠一只,采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出轉(zhuǎn)入超凈工作臺內(nèi)的解剖盤中,無菌操作打開腹腔,取出其脾臟,除去其周圍的脂肪組織,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,轉(zhuǎn)入無菌培養(yǎng)皿中待用。

         、卜蛛x脾細胞

          用滴管向培養(yǎng)皿中注入30滴PBS緩沖液,再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟,注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼,并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。

          吸取上述分離的單個脾細胞懸液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min離心5min。⒊培養(yǎng)脾細胞

          取塑料培養(yǎng)皿一套,用移液槍吸取培養(yǎng)液2mL加入塑料皿中,并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管,棄去上清液,用移液槍(200ul)吸取塑料皿中的培養(yǎng)液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中,用槍頭吹勻管底的脾細胞,吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中,混勻后放入37°C,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

          ⒋配制染液

          用生理鹽水配成5%臺盼藍染液,備用。⒌染色

          取0.5mL細胞懸濁液放入試管中,加入1-2滴染液;旌。2-5min后將細胞放在血細胞計數(shù)板上觀察死活情況,注意不要有

          氣泡產(chǎn)生,放大倍數(shù)為10x10。染色后活細胞不著色,死細胞顯示藍色。注意染色時間不能超過15min,否則染液將細胞毒殺。

         、队嫈(shù)

          在10x10倍的顯微鏡下觀察,計算血細胞計數(shù)板的4個4小方格的細胞數(shù)量。包括細胞總數(shù)與死細胞數(shù)量。壓線者計上不計下,計左不計右。

         、酚嬎慵毎盍

          根據(jù)公式:細胞活力=(總細胞數(shù)-死細胞數(shù))/總細胞數(shù)×100%

          實驗結(jié)果

          臺盼藍染色后的細胞(10x10)伊紅染色后的細胞(10x10)

          總細胞數(shù)和活細胞數(shù)統(tǒng)計表(10×10)

          項目自己培養(yǎng)細胞老師培養(yǎng)細胞總細胞數(shù)個/ml活細胞數(shù)個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論

          ⒈結(jié)果分析

          本次實驗中我們小組自己培養(yǎng)細胞所測細胞活力為21.4%,并不算高,分析得應有以下原因可能影響實驗結(jié)果(包括誤差):

          ⑴若在無菌操作的過程中操作不規(guī)范,導致染菌,會極大的影響觀察,導致實驗失敗。

          ⑵若在離心分離呈單細胞的過程中離心機轉(zhuǎn)速過快或時間過長很可能會導致細胞破裂,導致小鼠脾細胞大量死亡。

         、侨旧珪r間過長,或觀察時間過長都會導致染色試劑將細胞殺死,使細胞活力驟降,這是導致細胞活力比較低的重要原因。

          ⑷實驗中的一些操作不正確或不規(guī)范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導致實驗誤差。

         、沧⒁馐马

          ⑴嚴格進行動物消毒,需用75%酒精消毒。

         、茋栏襁M行無菌操作,防止細菌、霉菌、支原體污染,避免化學物質(zhì)污染。

         、俏∫后w前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液體時,避免碰撞。

         、入x心管入臺前,管口、管壁應消毒。

         、蓪嶒炚唠x開超凈臺時,要隨時用肘部關閉工作窗。

         、势鞑氖褂脮r既要注意用火焰消毒,又要防止燙傷、燙死細胞。

          細胞生物學實驗報告 2

          一、實驗目的:

          1、通過對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學顯微鏡觀察,了解細胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);

          2、學習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀認識。

          二、實驗材料和儀器:

          小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;

          普通光學顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。

          三、實驗步驟:

          (一)細胞形態(tài)觀察

          l、動物細胞的觀察

          (1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態(tài)構(gòu)造。

          (2)雞血細胞涂片的觀察:觀察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點。

          2、植物細胞的觀察

          取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結(jié)構(gòu)。

          (二)細胞的'大小和測量

          1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。

          2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

          3、小心移動鏡臺測微尺和轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

          4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:

          鏡臺測微尺的格數(shù)

          目鏡測微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10

          目鏡測微尺的格數(shù)

          四、實驗結(jié)果:

          1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24

          2、細胞大小的測量:

          五、作業(yè)與思考:

          1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。

          白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時,白細胞能穿過毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細胞形態(tài)見下圖。

          2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態(tài)圖見下。

          3、在不同放大倍數(shù)下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大,而更容易測量準確。

          細胞生物學實驗報告 3

          一、實驗目的

          1.觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期。

          2.初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。

          3.初步掌握繪制生物圖的.方法。

          二、實驗原理

          在植物體中,有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細胞,高等植物細胞有絲分裂的過程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期?梢杂酶弑讹@微鏡觀察植物細胞的有絲分裂的過程,根據(jù)各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識別該細胞處于有絲分裂的哪個時期,細胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色。

          三、材料用具

          洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養(yǎng)皿、鉛筆、質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸、體積分數(shù)為95%的酒精、質(zhì)量分數(shù)為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)

          四、實驗過程(見書P39)

          1.洋蔥根尖的培養(yǎng)(提前3—4天)

          2.解離:5min

          3.漂洗:10min

          4.染色:5min

          5.制片

          6.鏡檢

          五、注意

          1.解離充分是實驗成功的必備條件。解離充分,組織才能分散,細胞也不會重疊。

          2.漂洗時間一定要足夠,否則細胞染不上色。

          3.染色時,染液的濃度和染色時間必須掌握好。特別是染色不能過深,否則鏡下一片紫色,無法觀察。

          六、討論

          1.制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?談談你自己的體會。

          2.在觀察清楚有絲分裂各個時期的細胞以后,繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡圖,并標明時期。

          細胞生物學實驗報告 4

          一、實驗目的

          1. 初步學會觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法。

          2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。

          二、實驗原理

          當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞液中的水分就通過原生質(zhì)層進入外界溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細胞壁逐漸分離開,也就是分升了質(zhì)壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的'濃度時,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入細胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。

          三、材料用具

          紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

          四、實驗過程(見書P60)

          物理實驗報告 ——化學實驗報告 ——生物實驗報告 ——實驗報告格式 ——實驗報告模板

          五、討論

          1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?

          2.當紅細胞細胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?

          3.畫一個細胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過清水處理的細胞變化的一系列模式圖。

          細胞生物學實驗報告 5

          一、實驗目的

          1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

          2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布

          二、實驗原理

          高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的.光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。

          活細胞中的細胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),觀察細胞質(zhì)的流動,可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動做為標志。

          三、材料用具

          蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆

          四、實驗過程

          1、制作蘚類葉片的臨時裝片

          2、用顯微鏡觀察葉綠體

          3、制作黑藻葉片臨時裝片

          4、用顯微鏡觀察細胞質(zhì)流動

          五、討論

          1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動,為什么?

          2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關系?

          3、植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動有什么意義?

          4、用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。

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