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腋區(qū)解剖實(shí)驗(yàn)報(bào)告
在現(xiàn)實(shí)生活中，報(bào)告與我們的生活緊密相連，報(bào)告具有成文事后性的特點(diǎn)。那么大家知道標(biāo)準(zhǔn)正式的報(bào)告格式嗎？以下是小編收集整理的腋區(qū)解剖實(shí)驗(yàn)報(bào)告，僅供參考，歡迎大家閱讀。
蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)–腓腸肌標(biāo)本制備、不同頻率刺激對(duì)肌肉收縮的影響
一、目的要求
1、掌握蛙類(lèi)雙毀髓的試驗(yàn)方法；
2、掌握坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本標(biāo)本的制作方法；
3、觀察不同刺激頻率對(duì)骨骼肌收縮形式的影響。
二、基本原理
蛙類(lèi)動(dòng)物的某些基本活動(dòng)，如神經(jīng)的生物電活動(dòng)、肌肉收縮等與哺乳動(dòng)物相似。其離體組時(shí)所需的生活條件比較簡(jiǎn)單，易于控制和掌握，而且動(dòng)物來(lái)源豐富，因此在生理實(shí)驗(yàn)中常用蛙類(lèi)的坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本和坐骨神經(jīng)標(biāo)本來(lái)觀察組織的興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律以及骨骼肌收縮的特點(diǎn)等。肌肉受到一次閾上刺激而產(chǎn)生的一次收縮為單收縮，其過(guò)程可分為三個(gè)時(shí)相，即潛伏期、縮短期和舒張期。肌肉受到連續(xù)的閾上刺激時(shí)，如果刺激間隔小于單收縮的過(guò)程，相鄰兩單收縮的時(shí)相會(huì)出現(xiàn)融合，表現(xiàn)為強(qiáng)直收縮現(xiàn)象。如果表現(xiàn)為每次收縮的開(kāi)始發(fā)生在上次收縮的縮短期，稱(chēng)完全強(qiáng)直收縮，如果表現(xiàn)為每次收縮的開(kāi)始發(fā)生在上次收縮的舒張期，稱(chēng)不完全強(qiáng)直收縮。使用生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，可以觀察到腓腸肌收縮的情況。
三、實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康青蛙一只；
實(shí)驗(yàn)器材和藥品：蛙類(lèi)手術(shù)器械一套（粗剪刀一把，組織剪一把，眼科剪一把，鑷子一把，探針一根、玻璃分針2把，蛙釘4個(gè)、培養(yǎng)皿一個(gè)，蛙板一個(gè)、滴管一個(gè)、棉線若干），張力換能器，肌槽，刺激電極，鐵架臺(tái)，生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，微機(jī)，任氏劑。
四、實(shí)驗(yàn)步驟
搗毀蟾蜍腦脊髓：取蟾蜍一只，用自來(lái)水沖洗干凈。左手握蛙，用食指下壓頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯。中指與無(wú)名指夾其前肢，無(wú)名指與小指夾其后肢，使整個(gè)軀干做最大屈曲。把探針自枕骨大孔處垂直刺入，到達(dá)椎管，即將探針改變方向刺入顱腔，向各側(cè)不斷攪動(dòng)，徹底搗毀腦組織；再將探針原路退出，刺向尾側(cè)，捻動(dòng)探針使其逐漸刺入整個(gè)椎管內(nèi)，完全徹底搗毀脊髓。脊髓破壞完全的標(biāo)志是：下頜呼吸運(yùn)動(dòng)消失，反射消失，四肢松軟。
剪除軀干上部和內(nèi)臟，去皮，制備下肢標(biāo)本：用粗剪刀在骶髂關(guān)節(jié)前1厘米處剪斷脊柱，握住蟾蜍下肢，沿軀干兩側(cè)（避開(kāi)坐骨神經(jīng)）剪開(kāi)腹壁。此時(shí)軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干及內(nèi)臟組織。剪去肛周皮膚；用圓頭鑷子夾住脊柱，注意不要碰到坐骨神經(jīng)，捏住皮膚邊緣，逐步向下?tīng)坷瓌冸x皮膚。將全部皮膚剝除后，把標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。
洗凈雙手和用過(guò)的全部手術(shù)器械。
分離兩下肢：避開(kāi)坐骨神經(jīng)，用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨，然后沿中線將脊柱剪成左右兩半，再?gòu)膼u骨聯(lián)合中央剪開(kāi)，將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。
取出一下肢，用蛙釘固定于蛙板上，固定時(shí)要注意，坐骨神經(jīng)和腓腸肌朝上。先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分直至腘窩，在分離過(guò)程中，把神經(jīng)周?chē)慕Y(jié)締組織去除干凈，并把神經(jīng)的細(xì)小分支剪斷，但要注意不要用金屬器械碰觸神經(jīng)，也不要對(duì)神經(jīng)過(guò)度牽拉。實(shí)驗(yàn)期間應(yīng)不斷滴加任氏液使神經(jīng)保持濕潤(rùn)。
用玻璃分針游離腓腸肌，并在下面穿線，在跟腱處打結(jié)。在結(jié)扎線的下方剪斷跟腱，在膝關(guān)節(jié)處把除腓腸肌外的小腿其他部分剪除。注意保持完整的腓腸肌。
用棉線在靠近脊柱的位置結(jié)扎坐骨神經(jīng)，并在結(jié)扎線的上方剪斷神經(jīng)，用眼科剪剪斷坐骨神經(jīng)的全部分
支。從腘窩處開(kāi)始剪掉大腿所有的肉，盡量把股骨刮干凈，在膝關(guān)節(jié)上至少1cm處剪去上段股骨。將標(biāo)本浸入任氏劑的培養(yǎng)皿中。
實(shí)驗(yàn)裝置與儀器連接：1、將標(biāo)本股骨殘端固定在肌槽上的小孔內(nèi)；2、將結(jié)扎腓腸肌肌腱的棉線與張力換能器連接，調(diào)節(jié)棉線的松緊，要與桌面垂直；3、將神經(jīng)置于肌槽的刺激電極上，用任氏劑保持標(biāo)本濕潤(rùn)；4、刺激電極插入微機(jī)上的刺激輸入孔；5、張力換能器與微機(jī)相應(yīng)通道相連。
打開(kāi)電腦，進(jìn)入生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，在菜單欄選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”》“神經(jīng)肌肉”》“刺激強(qiáng)度與反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)?zāi)K”點(diǎn)擊開(kāi)始，調(diào)節(jié)刺激參數(shù)，使頻率自動(dòng)逐漸遞增，串間隔為2、連續(xù)記錄不同頻率時(shí)的肌肉收縮曲線。
五、結(jié)果與分析
不同頻率刺激對(duì)肌肉收縮的影響：串間隔為2,頻率增量為1時(shí)的張力變化（如圖）可見(jiàn)單收縮、不完全強(qiáng)直收縮、完全強(qiáng)直收縮。
分析：刺激強(qiáng)度到達(dá)閾刺激時(shí)腓腸肌開(kāi)始收縮，在最大刺激收縮力前隨刺激強(qiáng)度增大而增大，到達(dá)最大刺激強(qiáng)度后，收縮力不發(fā)生明顯改變；在最大刺激強(qiáng)度條件下，某較小頻率使腓腸肌發(fā)生單收縮(如圖中第一次刺激)，頻率增大到，單收縮變?yōu)椴煌耆珡?qiáng)直收縮（如圖中第26次刺激），頻率繼續(xù)增大，不完全強(qiáng)直收縮變?yōu)橥耆珡?qiáng)制收縮（如圖中第7、8次刺激）。不同的腓腸肌其閾刺激，最大刺激均存在差異；其單收縮，不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮所要頻率也不盡相同。
六、實(shí)驗(yàn)總結(jié)
本次試驗(yàn)嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行，所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果較為理想，很容易觀察到腓腸肌的單收縮、不完全強(qiáng)直收縮、完全強(qiáng)直收縮現(xiàn)象。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是最繁瑣的步驟，也是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵所在，期間，我們進(jìn)行的比較緩慢，生怕弄錯(cuò)了哪一步，一步步想原理、回憶老師是怎么說(shuō)的，所幸的是我們最終成功了，得到了較好的結(jié)果，在這次的不斷嘗試和思考中，很好地鍛煉了我們的動(dòng)手能力和思維能力。
離體蛙心灌流
一、【目的要求】
1、學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法;
2、了解心肌的生理特性;
3、觀察Na+,K+,Ca2+及腎上腺素(Adr),乙酰膽堿(ACh)等對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響。
二、【原理】
將離體蛙心（失去神經(jīng)支配的蛙心）保持在適宜的環(huán)境中，在一定的時(shí)間內(nèi)仍然能夠保持節(jié)律性收縮，心臟正常的節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的理化環(huán)境，離體心臟也是如此，離體心臟脫離了機(jī)體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響，可以通過(guò)改變灌流液的某些成分，觀察其對(duì)心臟活動(dòng)的作用。心肌細(xì)胞的自律性、興奮性、傳導(dǎo)性及收縮性，都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。血鉀濃度過(guò)高時(shí)（高于7.9mmol/L），心臟興奮性、自律性、傳導(dǎo)性及收縮性都下降，表現(xiàn)為收縮力減弱、心動(dòng)過(guò)緩和傳導(dǎo)阻滯，嚴(yán)重時(shí)心臟可停搏于舒張期。血鈣濃度升高時(shí)，心臟收縮力增強(qiáng)，過(guò)高可使心室停搏于收縮期。血鈣濃度降低，心肌收縮力減弱。血中鈉離子濃度的輕微變化，對(duì)心肌影響不明顯，只有發(fā)生明顯變化時(shí)，才會(huì)影響心肌的生理特性。腎上腺素可使心率加快、傳導(dǎo)加快及心肌收縮力增強(qiáng)，乙酰膽堿則與腎上腺素的作用相反。
三、【實(shí)驗(yàn)儀器】
青蛙、常用手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤(pán))、蛙心夾、計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、雙凹夾、雙針形露絲刺激電極、滴管、培養(yǎng)皿(或小燒杯)、紗布、棉線、橡皮泥、任氏液。蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夾、0.65％NaCl、5％NaCI.2％CaCl2.1％KCl.1：5 000腎上腺素、1：10 000乙酰肌堿、300U／mL肝素。
四、【方法與步驟】
1、斯氏蛙心插管法
�。�1）一只青蛙，雙毀髓后背位置于蠟盤(pán)中，按前面的方法暴露心臟。仔細(xì)識(shí)別心臟周?chē)拇笱?見(jiàn)右圖)。在左主動(dòng)脈下方穿一線，于動(dòng)脈圓錐處結(jié)扎(動(dòng)物個(gè)體小時(shí)，結(jié)扎位置可靠上些)。再?gòu)淖笥覂芍鲃?dòng)脈下方穿一線，并打一活結(jié)備用。左手提起主動(dòng)脈上的結(jié)扎線，右手用眼科剪在結(jié)扎線下方、沿向心方向?qū)?dòng)脈上壁剪一斜口。選擇大小適宜的蛙心套管，然后將盛有少量(套管內(nèi)2～3 cm高度)任氏液(內(nèi)加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山開(kāi)口處插入動(dòng)脈圓錐(見(jiàn)右圖)。當(dāng)套管尖端到達(dá)動(dòng)脈圓錐基部時(shí)，應(yīng)將套管稍稍后退，使尖端向動(dòng)脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn)，經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)(于心室收縮時(shí)插入，但不可插得過(guò)深，以免心室壁堵住套管下口)。此時(shí)可見(jiàn)套管中血液沖人套管，并使液面隨心臟搏動(dòng)而亡下移動(dòng)，表明操作成功(否則需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液，更換新鮮任氏液。穩(wěn)定住套管后，輕輕提起備用線，將左、右主動(dòng)脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液)，再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上，然后剪斷結(jié)扎線上方的血管。輕輕提起套管和心臟，看清靜脈竇的位置，于靜脈竇下方剪斷有牽連的組織，僅保留靜脈竇與心臟的聯(lián)系，使心臟離體(切勿損傷靜脈竇)。用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)余血，使套管內(nèi)灌流液不再有殘留血液。保持套管內(nèi)液面高度一致(1.5～2 cm)，即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
（2）將插好離體心臟的套管固定在支架上，用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不可夾得過(guò)多，以免因夾破心室而漏液)。再將蛙心夾上的系線繞過(guò)一個(gè)滑輪與張力傳感器相連（如右圖）。注意：勿使灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)顯示器上心臟收縮曲線的幅度適中。
2、實(shí)驗(yàn)觀察
(1)記錄正常心搏曲線
(2)改用0、65％NaCI溶液灌流，并作好加藥標(biāo)記，觀察心搏變化。待曲線氏插管裝置出現(xiàn)明顯變化時(shí)，立即吸去套管中的灌流液，同時(shí)做好沖洗標(biāo)記，并用新鮮任氏液清洗2—3次，待心搏恢復(fù)正常。注意：換液時(shí)切勿碰套管，以免影響描記曲線的基線，同時(shí)保持灌流液面一致(以下同)。觀察可得，NaCI溶液會(huì)阻遏心臟搏動(dòng)。
(3)迅速用新鮮任氏液清洗2～3次，待心搏恢復(fù)正常。向套管內(nèi)加入1～3滴2％CaCI：溶液，觀察并記錄心搏曲線的變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化時(shí)，立即更換任氏液，待心搏恢復(fù)正常(如果恢復(fù)遲緩，可多次沖洗)。
(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時(shí)，同法更換灌流液，待心搏恢復(fù)正常。
(5)同法記錄套管中加入l～2滴的腎上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲線的變化。
(6)同法記錄套管中加入1—2滴乙酰膽堿溶液(1：10 000)后心搏曲線的變化。
五、【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與原因分析】
曲線的幅度————收縮的程度
曲線的密度————心率
曲線的基線————舒張的程度
1、正常收縮曲線圖
分析：
2、滴加含鈉離子溶液圖
分析：滴加Na離子溶液后，心跳減弱，這種現(xiàn)象出現(xiàn)的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+，當(dāng)Na＋明顯增高時(shí)，膜內(nèi)外鈉離子的濃度梯度增大，因此，細(xì)胞Na離子內(nèi)流加快，去極速
2＋度和幅度均增加，導(dǎo)致傳導(dǎo)性和自律性增高。同時(shí)，Na離子內(nèi)流的增多促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)Ca的
2＋外運(yùn)使細(xì)胞內(nèi)Ca濃度降低，因此，心肌收縮能力減弱。
3、滴加2%CaCl溶液
分析：細(xì)胞外Ca2＋在細(xì)胞膜上對(duì)Na＋內(nèi)流有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用，稱(chēng)為膜屏障作用。[Ca2＋]增高時(shí)，Na＋內(nèi)流受抑制，細(xì)胞0期除極速度與幅度減小，使興奮性及傳導(dǎo)性均降低。[Ca2＋]增高使Ca2＋內(nèi)流增多，因此慢反應(yīng)細(xì)胞0期去極化加快加強(qiáng)，傳導(dǎo)性增高，而快反應(yīng)細(xì)胞平臺(tái)期縮短，有效不應(yīng)期縮短，復(fù)極加速。Ca2＋內(nèi)流增多，使心肌收縮能力增強(qiáng)。[Ca2＋]降低時(shí)，所引起的變化與高鈣時(shí)相反。因此加入CaCl2后，心率減少、振幅減少，基線上移。
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